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Design des Konstruktes (Fusionsprotein, Auswahl eines geeigneten Tags)
Auswahl eines geeigneten Expressionssystems (eu- oder prokaryotisch)
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Design of construct (fusion protein, selection of a suitable tag)
Selection of a suitable expression system (eucaryotic, procaryotic)
www-alt.igb.fraunhofer.deDas CALM / AF10 Fusionsprotein vereinigt in sich praktisch das gesamte CALM-Protein und AF10-Protein mit Ausnahme der N-Terminalen Plant Homeo Domäne ( PHD ) von AF10.
Die retrovirale Expression des CALM/AF10-Fusionsprotein in murinen Knochenmarkzellen führt zur Entwicklung einer aggressiven akuten Leukämie.
Es ist unser Ziel, die Mechanismen, die zur Leukämieentstehung durch das CALM/AF10 Fusionsprotein beitragen, näher zu verstehen.
www.ngfn.deThe CALM / AF10 fusion protein contains the complete CALM and almost the complete AF10 protein with the exeption of the N terminal Plant homeo Domain ( PHD ) of AF10.
The retroviral expression of CALM/FA10 in murine bone marrow cells leads to the development of an aggressive acute leukemia.
It is our aim to understand the mechanisms that contribute to CALM/AF10 mediated leukemogenesis.
www.ngfn.deIm Vergleich zum bisher verwendeten KRN Liganden korrelierten die mit DB03-4, dem besten selektierten Liganden, erzielten Antitumoreffekte mit der schnelleren Ausschüttung von Th1 Cytokinen, die nach jeder Injektion des rekombinanten Proteins erfolgte.
Der nächste Schritt wird die stabile Vernetzung des Glykolipidanalogs mit dem CD1d-antitumor scFv Fusionsprotein sein, um sicherzustellen, dass alles injizierte Fusionsprotein in vivo mit dem Glykolipid verbunden und damit die Kapazität zur Umleitung von aktivierten iNKT Zellen zu Tumoren erhalten bleibt.
Eine weitere Strategie zur Verbesserung der Effizienz der CD1-vermittelten Immuntherapie besteht in der Erhöhung der Häufigkeit von iNKT Zellen, welche im Blut von Menschen und Mäusen in relativ kleinen Mengen vorhanden sind (< 1 % der zirkulierenden mononuklearen Zellen) .
www.isrec.chCompared to the KRN ligand used so far, the stronger antitumor effects obtained with the best selected ligand, DB03-4, correlated with the faster release of Th1 cytokines that occurred after each injection of the recombinant protein.
The next step will be to crosslink the glycolipid analog on the CD1d-scFv fusion protein to insure that all the fusion protein injected in vivo remains loaded with the glycolipid and retains the capacity to redirect activated iNKT cells to the tumor site.
Another strategy to improve the efficacy of the CD1d-mediated immunotherapy is to increase the frequency of iNKT cells, which are present in rather small numbers in human and mouse blood (< 1 % circulating mononuclear cells) .
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